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液相解决方案

饲料中维生素B2的液相色谱(HPLC)检测方案

添加时间:2016-7-21 16:34:54 浏览量:

 维生素B2又叫做核黄素,为异咯嗪衍生物,桔黄色,易被碱、光及金属元素破坏。核黄素是许多氧化还原酶的重要组成部分,参与能量和蛋白质代谢。动物缺乏核黄引起体代谢紊乱。其症状:轻则表现为生长受阻,生产力下降,严重者,猪发生皮炎,形成痂皮及脓肿,眼结膜、角膜炎;母畜缺乏则出现早产,胚胎死亡及胎儿畸形;雏鸡的典型症状为足跟关节肿胀,趾内向弯曲成拳状,急性缺乏症能使腿部完全麻痹、瘫痪;种鸡缺乏时,种蛋孵化率低,雏鸡成活率低。


液相色谱法对饲料中维生素B2的详细检测方法


仪器配置




试样溶液的制备


称取维生素预混合饲料0.25g-0.5g,于100ml棕色容量瓶中,加入三分之二的提取液于80-100℃水浴中煮沸30min,待冷却后加入14ml甲醇,用提取液定容至刻度,混匀,过滤。维生素预混合饲料样液需有提取液进一步5倍-10倍,取部分过滤液过0.45μm滤膜过滤,液相色谱仪分析。


色谱条件


色谱柱: C18150mm×4.6mm×5μm


流速:1.0mL/min


温度:室温


进样量:20μL


检测波长:单检维生素B2为267nm,多种维生素联检为280nm。


流动相:在已装入700ml去离子水的1000ml容量瓶中,加入50mgEDTA、1.1g庚烷磺酸钠,待全溶解后,加入25ml冰乙酸、5ml三乙胺,用去离子水定容至刻度摇匀。用冰乙酸、三乙胺调解pH至3.4±0.02,过0.45μm滤膜,取该溶液860ml与140ml甲醇混合,超声脱气,待用。


 维生素B2标准液相色谱图


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